İnfertil olgularda, yoğunluk sıralayıcı (Gradyen) ve PICSI ile seçilmiş spermler ile elde edilen embriyoların FISH yöntemi ile genetik analizi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: İstanbul Yeni Yüzyıl Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, HİSTOLOJİ VE EMBRİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2017
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: NAZMİ SELMAN KAL
Danışman: TÜLAY İREZ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:ÖZET Kal N.S. İNFERTİL OLGULARDA, YOĞUNLUK SIRALAYICISI (GRADYEN) VE PICSI İLE SEÇİLMİŞ SPERMLER İLE ELDE EDİLEN EMBRİYOLARIN FISH YÖNTEMİ İLE GENETİK ANALİZİ Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Klinik Embriyoloji programı. Yüksek Lisans Tezi. İstanbul 2017. Amaç: Bu çalışmada önceki uygulamalarında kromozom anormalliği olan ve IVF sonuçları başarısız olan genç hastalarda yoğunluk gradiyent ile veya PICSI ile seçilmiş spermler kullanılarak elde edilen embriyolarda aneuploidi oranlarının karşılaştırılması amaçlandı. Materyal ve metod: Bu çalışma U.K.C.F.A. IVF merkezinde uygulaması yapılan, önceki uygulamalarında kromozom anormaliği saptanan 27 hastanın embriyo biopsisi sonucu elde edilen verilerin analizi ile yapılmıştır. Bu çalışmaya PCO, endometriosis ve ileri kadın yaşı faktörlü hastalar ve akraba evliliği dahil edilmemiştir. 27 hasta üzerinde yapılan bu çalışmada toplam 471 oosit kullanılmıştır. Bunlardan 236 adet oosit gradyen metodu ile seçilmiş spermlerle döllenmiş, 235 adet oosit ise PICSI yöntemiyle seçilen spermlerle döllenmiştir. Çalışmada 223 blastokist gelişmiş ve bunlardan 97'sı gradyen yöntemi ile elde edilen spermlerle ICSI yapılmış 129'una PICSI yöntemi ile elde edilen spermler kullanılarak ICSI yapılmıştır. Elde edilen blastokistlere trofektoderm biopsisi yapılmış ve FISH yöntemi ile 13, 18, 21, X ve Y kromozomları incelenmiştir. Sonuçların değerlendirilmesi için Chi-Square testi kullanılmıştır. Bulgular: Kadınlardan OPU (oosit pick-up) yöntemi ile toplanan oositlerin (471) ortalama değerleri 21,8 ± 5,0 (µ±σ)'dir. Denüdasyon (ayıklama) işlemi sonrası elde edilen M2 (metafaz II) matür oosit ortalama değeri 17.4 ± 3,9 (µ±σ)'dür. Ortalama sperm konsantrasyonu 54,1(milyon) ml/sayı ±32,4 (µ±σ), total motilite 50,4%±12,4(µ±σ)'dür. Gradyen yöntemiyle elde edilen spermlerin ortalama konsantrasyonu 21,9 ml/sayı (milyon)±11,2 (µ±σ), total motilite 77,6(%)±9,3(µ±σ)'dür. PICSI yöntemiyle seçilen spermler ile yapılan ICSI'nin, gradyen yöntemiyle seçilmiş spermlere göre gelişen embriyolarda 2PN (pronükleus) oranları anlamlı farklı görülmüştür. (p=0,003) Embriyo gelişim takibinde ikinci gün embriyo hücre sayısı >=4, blastomerde tek çekirdek varlığı, embriyo fragmantasyonu ve blastomer parlaklığı incelenmiş ve anlamlı bir fark gözlenmemiştir. (p=0,346, p=0,100, p=0,717, p=0,297) . Üçüncü gün embriyolarında her iki grup karşılaştırıldığında hücre sayısı >=8 olduğu durumda, blastomerde tek çekirdek varlığı, fragmantasyon ve blastomer parlaklığı değerlerinin istatistiki anlamlılığı bulunmamıştır. (p=0,383, p=0,341, p=0,487, p=0,932). Embriyolardan blastokist gelişimi gösterenlere yapılan trofektoderm biyopsisi sonrası FISH yöntemiyle 13, 18, 21, X ve Y kromozomlarında anöploidi oranları incelenmiş, Gradyen veya PICSI ile seçilen spermlerle yapılan ICSI işlemi ile elde edilen blastokistlerin kromozom anomalisi açısından her iki grubun farklı olmadığı görülmüştür(p=0,065). 27 hastaya yapılan sağlıklı embriyo transferinde gebelik oranları gradyen yöntemiyle seçilen spermlerle elde edilen veya PICSI işlemiyle seçilen spermlerle elde edilen embriyo transferi işlemi ile karşılaştırıldığında istatistiki olarak anlamlı bir fark görülmemiştir (p=0,075). Tartışma: Bu çalışmada elde edilen sonuçlar PICSI ile ve gradyen yöntemi ile seçilen spermler ile elde edilen embriyoların aneuploidy oranlarının ve gebelik oranlarının benzer olduğunu göstermiştir. Çalışmanın elde edilen sonucuna bağlı olarak PICSI yönteminin yararının tartışmalı olabileceği kanısına varılmıştır. Çalışmanın bu nedenle geniş hasta gruplarında tekrarlanması uygun bulunmuştur. Anahtar kelimeler: PICSI, Gradyen, kromozom, FISH, ICSI